氣相色譜儀測定肉制品中吡菌磷殘留量的方法原理：

樣品采用環(huán)己烷-乙酸乙酯(1+1，體積比)均質(zhì)提取，提取液用凝膠滲透色譜凈化，濃縮定容后用氣相色譜儀測量，外標(biāo)定量。

1.凝膠凈化提取物：

取環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶劑(1+1) 100 mL 加入環(huán)己烷 100 mL 乙酸乙酯，搖勻備用。

2.標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品:吡菌磷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):純度:≥97%。

3.標(biāo)準(zhǔn)溶液制備：

1)吡菌磷標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:準(zhǔn)確稱取適量吡菌磷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(精確至 0.1 mg），甲苯濃度約為 1.0 mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

2)吡菌磷標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:根據(jù)檢測要求，用正己烷稀釋上述標(biāo)準(zhǔn)儲備稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

1.氣相色譜儀：配備火焰光度檢測器（FPD），帶磷濾光片。

2.凝膠滲透色譜儀。

分析天平：感覺 0.01 g 和 0.0001 g。

4、離心機(jī)。

5.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。

6.氮?dú)獯蹈蓹C(jī)。

7、均質(zhì)器。

1、提取：

稱取10 g樣品(精確到0.01 g）于盛有20 g100無水硫酸鈉 mL在離心管中，加入30 mL環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶劑，均質(zhì)器為15 000 r/min均質(zhì)提取1.5 min后，在3 000 r/min離心3 min。上清液通過裝有無水硫酸鈉的筒上清液100 mL梨形瓶中。殘?jiān)?0 mL同上提取環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶劑，合并兩次提取物，用少量環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶劑清洗無水硫酸鈉柱。將提取液于40℃水浴旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約2 mL，待凈化。

2.凝膠色譜凈化:

1)凝膠滲透色譜儀的色譜條件:

a）凈化柱：400 mm×25 mm，內(nèi)裝 BIO-Beads S-X3 填料或相等。

b）流相：環(huán)己烷-乙酸乙酯(1+1，體積比)。

c）流速：5 mL/min。

d）進(jìn)樣量：5 mL。

e）開始收集時(shí)間：1 200 s。

f）收集時(shí)間結(jié)束：1 800 s。

2)凈化步驟：

將濃縮提取物轉(zhuǎn)移到10 mL在刻度離心試管中，用環(huán)己烷-乙酸乙酯混合溶劑多次洗滌梨形瓶，合并洗液，定容至刻度。在4 000 r/min離心5 min之后，上清液用0.45 μm有機(jī)相濾膜濾入凝膠滲透色譜儀進(jìn)樣瓶中。用凝膠滲透色譜儀凈化，收集1 200 s～1 800 s的流出液。用氮?dú)獯蹈蓹C(jī)吹干流出液，加1.0 mL正己烷溶解、混合、供氣相色譜儀測定。

3.氣相色譜儀測定:

1)氣相色譜儀的色譜條件:

a）色譜柱：HP-5，30 m×0.32 mm（i.d.），膜厚 0.25 μm，或相當(dāng)者。

b）色譜柱溫度：初始溫度 220℃，保持 10 min；以 10℃/min 的速率升至 250℃，保持 7 min。

c）載氣（N2）：1.5 mL/min。

d）氫氣（H2）：75 mL/min。

e）空氣：100 mL/min。

f）檢測器溫度：280℃。

g）進(jìn)口溫度：250℃。

h）進(jìn)樣體積：1 μL。

i）進(jìn)樣方式：無分流進(jìn)樣，1.5 min 然后打開分流閥。

2)色譜測定：

根據(jù)樣品中吡菌磷的含量，選擇適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和待測樣品。標(biāo)準(zhǔn)工作液和待測樣品中吡菌磷的響應(yīng)值應(yīng)在儀器響應(yīng)線性范圍內(nèi)。在上述色譜條件下，吡菌磷的保留時(shí)間約為14.9 min，根據(jù)峰面積外標(biāo)法定量。